As in ynstrumint mei hege presyzje kin HPLC maklik liede ta wat lestige lytse problemen as it net op 'e juste manier wurdt eksploitearre tidens gebrûk.Ien fan 'e meast foarkommende problemen is it probleem fan kolomkompresje.Hoe kinne jo in defekte chromatograaf fluch oplosse.It HPLC-systeem bestiet benammen út in reservoirflesse, in pomp, in ynjeksje, in kolom, in kolomtemperatuerkeamer, in detektor en in gegevensferwurkingssysteem.Foar it hiele systeem binne de pylders, pompen en detektors de wichtichste komponinten en de wichtichste lokaasjes dy't gefoelich binne foar problemen.
De kaai foar kolomdruk is it gebiet dat nau omtinken nedich is by it brûken fan HPLC.De stabiliteit fan kolomdruk is nau besibbe oan chromatografyske pykfoarm, kolomeffisjinsje, skiedingseffisjinsje en retensjetiid.Column druk stabiliteit betsjut net dat de druk wearde is stabyl op in stabile wearde, mar leaver dat de druk fluktuaasje berik is tusken 345kPa of 50PSI (mei it brûken fan gradient eluaasje as de kolom druk is stabyl en stadich feroaret).Te hege of te leech druk is in kolom druk probleem.
De meast gefoelich foar HPLC-fouten en oplossingen
1, hege druk is it meast foarkommende probleem yn it brûken fan HPLC.Dit betsjut in hommels tanimming fan druk.Yn it algemien binne d'r de folgjende redenen: (1) Yn 't algemien komt dit troch blokkade fan streamkanaal.Op dit punt moatte wy it stikjes ûndersykje.in.Earst snijje de ynlaat fan 'e fakuümpomp ôf.Op dit punt waard de PEEK-buis fol mei flüssigens, sadat de PEEK-buis lytser wie as de solventfles om te sjen oft de flüssigens op wil drippe.As de floeistof net dript of stadich dript, wurdt de solventfilterkop blokkearre.Behanneling: Soak yn 30% salpetersäure foar in heal oere en spielje mei ultrasuver wetter.As de floeistof willekeurich dript, is de solventfilterkop normaal en wurdt kontrolearre;b.Iepenje de Purge fentyl sadat de mobile faze giet net troch de kolom, en as de druk is net gâns fermindere, de filter wite kop is blokkearre.Behanneling: Filtere wytkoppen waarden fuortsmiten en sonicated mei 10% isopropanol foar in heal oere.Oannommen dat de druk falt ûnder 100PSI, is de filtere wite kop normaal en wurdt kontrolearre;c.Fuortsmite de útgong ein fan 'e kolom, as de druk net ôfnimme, de kolom wurdt blokkearre.Behanneling: As it is in buffer sâlt blokkade, spoel 95% oant de druk is normaal.As de obstruksje wurdt feroarsake troch wat mear behâlden materiaal, moat in sterkere stream dan de hjoeddeistige mobile faze brûkt wurde om nei normale druk te rinnen.As de lange-termyn skjinmeitsjen druk net ôfnimt neffens de boppesteande metoade, de yn- en útgong fan 'e kolom kin beskôge wurde ferbûn mei it ynstrumint oarsom, en de kolom kin wurde skjinmakke mei de mobile faze.Op dit stuit, as de kolom druk is noch net fermindere, de kolom yngong sieve plaat kin allinnich wurde ferfongen, mar ien kear de operaasje is net goed, it is maklik te liede ta de fermindering fan de kolom effekt, dus besykje te brûken minder.Foar drege problemen kin kolomferfanging wurde beskôge.
(2) Ferkearde flow rate ynstelling: Korrekte flow rate kin weromsette.
(3) Ferkearde streamferhâlding: de viskositeitsyndeks fan ferskate ferhâldingen fan streamingen is oars, en de oerienkommende systeemdruk fan 'e stream mei hegere viskositeit is ek grutter.As it mooglik is, kinne oplosmiddels mei legere viskositeit wurde ferfongen of opnij ynsteld en taret.
(4) Systeem druk nul drift: oanpasse de nul fan de floeistof nivo sensor.
2, de druk is te leech (1) wurdt meastal feroarsake troch systeem leakage.Wat te dwaan: Fyn elke ferbining, benammen de ynterface oan beide úteinen fan 'e kolom, en draai it lekgebiet oan.Fuortsmite de post en strak of line de PTFE film mei passende krêft.
(2) It gas komt yn 'e pomp, mar de druk is meastentiids ynstabyl op dit stuit, heech en leech.Mear serieus, de pomp sil net by steat wêze om te absorbearjen de floeistof.Behanneling metoade: iepenje it skjinmeitsjen fentyl en skjin op in trochstreaming fan 3 ~ 5ml / min.As net, luchtbellen waarden aspirearre by de exhaust fentyl mei help fan in tawijd needle buis.
(3) Gjin mobile faze útstream: kontrolearje oft der in mobile faze yn de reservoir flesse, oft de sink is ûnderdompele yn de mobile faze, en oft de pomp rint.
(4) De referinsjeklep is net sluten: de referinsjeklep is sletten nei fertraging.It giet normaal omleech nei 0,1.~ 0.2mL/min nei it sluten fan de referinsjeklep.
Gearfetting:
Yn dit papier wurde allinich mienskiplike problemen yn floeistofchromatografy analysearre.Fansels sille wy yn ús praktyske tapassing mear oare problemen tsjinkomme.By it ôfhanneljen fan skuld moatte wy de folgjende prinsipes folgje: allinich ien faktor tagelyk feroarje om de relaasje tusken de hypotetyske faktor en it probleem te bepalen;Algemien, by it ferfangen fan dielen foar Troubleshooting, wy moatte betelje omtinken oan in set de ûntmantele yntakt dielen werom yn plak om foar te kommen ôffal;It foarmjen fan in goede rekôrgewoante is de kaai foar it sukses fan it ôfhanneljen fan skuld.Ta beslút, by it brûken fan HPLC, is it wichtich om omtinken te jaan oan sample foarbehanneling en goede wurking en ûnderhâld fan de apparatuer.
Post tiid: Sep-18-2023